Search Images Play YouTube Gmail Drive Calendar Translate More »
Sign in
Screen reader users: click this link for accessible mode. Accessible mode has the same essential features but works better with your reader.

Patents

  1. Advanced Patent Search
Publication numberWO1998020013 A1
Publication typeApplication
Application numberPCT/EP1997/006184
Publication date14 May 1998
Filing date7 Nov 1997
Priority date7 Nov 1996
Also published asCA2270973A1, CN1236369A, DE19645974C1, EP0937089A1
Publication numberPCT/1997/6184, PCT/EP/1997/006184, PCT/EP/1997/06184, PCT/EP/97/006184, PCT/EP/97/06184, PCT/EP1997/006184, PCT/EP1997/06184, PCT/EP1997006184, PCT/EP199706184, PCT/EP97/006184, PCT/EP97/06184, PCT/EP97006184, PCT/EP9706184, WO 1998/020013 A1, WO 1998020013 A1, WO 1998020013A1, WO 9820013 A1, WO 9820013A1, WO-A1-1998020013, WO-A1-9820013, WO1998/020013A1, WO1998020013 A1, WO1998020013A1, WO9820013 A1, WO9820013A1
InventorsKesel Andreas Johannes, Oberthuer Walter
ApplicantKesel Andreas Johannes, Oberthuer Walter
Export CitationBiBTeX, EndNote, RefMan
External Links: Patentscope, Espacenet
New knoevenagel condensation products, method for their production and their use
WO 1998020013 A1
Abstract
The present invention relates to new Knoevenagel condensation products, the method for their production and their use, specially for pharmaceutical and analytical purposes. Further, conjugates of Knoevenagel condensates with biomolecules are disclosed. The invention is characterized by the compound of formula (3).
Claims  translated from German  (OCR text may contain errors)

18 18

Ansprüche Claims

Verbindungen der allgemeinen Formel (8) Compounds of the general formula (8)

Figure imgf000021_0001

worin: wherein:

X 1 , X 2 und X 3 jeweils unabhängig ausgewählt sind aus O, S, und NR 5 ; X 1, X 2 and X 3 are each independently selected from O, S, and NR 5;

YO oder S ist; Y is O or S;

Z CR 5 oder N ist; Z is CR 5 or N;

R 1 , R 2 , R 3 , R 4 und R 5 jeweils unabhängig ausgewählt sind aus beliebigen Substituenten; R 1, R 2, R 3, R 4 and R 5 are each independently selected from any substituent;

R 6 ausgewählt ist aus gegebenenfalls substituierten Kohlenwasserstoffresten und O und n 0 oder 1 ist; sowie Salze, Hydrate und Stereoisomere davon, mit der Maßgabe, daß die Verbindung nicht Pyridoxylidenrhodanin ist. R 6 is selected from optionally substituted hydrocarbon groups, and O, and n is 0 or 1, and salts, hydrates, and stereoisomers thereof, with the proviso that the compound is not Pyridoxylidenrhodanin.

2. 2 Verbindungen nach Anspruch 1 , worin X 1 0 ist. Compounds according to claim 1, wherein X 1 is 0th

ERSATZBUTT (REGEL 26) - 1 9 - REPLACEMENT BUTT (RULE 26) - 1 9 -

3. 3 Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 oder 2, worin X 2 NR 5 ist. Compounds according to any one of claims 1 or 2, wherein X 2 is NR 5th

4. 4 Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin X 3 S ist. Compounds according to any of the preceding claims, wherein X 3 is S.

5. 5 Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin YS ist. Compounds according to any of the preceding claims, wherein Y is.

6. 6 Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin Z CR 5 ist. Compounds according to any of the preceding claims, wherein Z is CR 5th

7. 7 Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin einer der Substituenten R 1 -R 4 eine negativ geladene Gruppe enthält. Compounds according to any of the preceding claims, wherein one of the substituents R 1-R 4 contains a negatively charged group.

8. 8 Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche, ausgewählt aus (Z)-5[[5-Hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)me- thyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon der Formel (3) Compounds according to any of the preceding claims, selected from (Z) -5 [[5-Hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone of the formula (3)

Figure imgf000022_0001

sowie Salze, Hydrate und Stereoisomere davon. as well as salts, hydrates, and stereoisomers thereof. - 20 - - 20 -

9. 9 Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel (8), dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der Formel (9) A process for preparing a compound of general formula (8), characterized in that a compound of formula (9)

Figure imgf000023_0001

in einer Knoevenagel-Kondensation umsetzt mit einer Verbindung der Formel (10) in a Knoevenagel condensation with a compound of formula (10)

(10) (10)

[il [Il

worin X 1 , X 2 , X 3 , Y, Z, R 1 -R 5 und R 6 wie in Anspruch 1 definiert sind. wherein X 1, X 2, X 3, Y, Z, R 1-R 5 and R 6 are as defined in claim 1.

ERSATZBUTT (REGFI 26) - 21 - 0. REPLACEMENT BUTT (REGFI 26) - 21 - 0 Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß man Pyridoxal-5'-phosphat in einer Knoevenagel-Kondensation umsetzt mit Rhodanin. A process for preparing a compound according to claim 8, characterized in that pyridoxal-5'-phosphate is reacted in a Knoevenagel condensation with rhodanine.

1 . First Pharmazeutische Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie als Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 sowie gegebenenfalls pharmazeutisch übliche Zusatz-, Hilfs-, Träger- und Verdünnungsstoffe enthält. Pharmaceutical composition, characterized in that it contains as active ingredient a compound according to any one of claims 1 to 8 and optionally pharmaceutically conventional additives, excipients, carriers and diluents.

2. 2 Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Behandlung von Infektionskrankheiten, Tumoren und Autoimmun- krankheiten. Use of a compound according to any one of claims 1 to 8 for the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment of infectious diseases, tumors and auto-immune diseases.

3. 3 Verwendung nach Anspruch 1 2 zur Herstellung eines Antivirusmittels. Use according to claim 1 2, for preparing an anti-viral agent.

4. 4 Verwendung nach Anspruch 1 3, zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von viralen Infektionen verursacht durch Hepatoviren, Herpesviren oder Retroviren. Use according to claim 1 to 3, for preparing an agent for the treatment of viral infections caused by Hepatoviren, herpes viruses or retroviruses.

5. 5 Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Use of a compound according to any one of claims 1 to 8 for the preparation of a pharmaceutical composition for the

Behandlung von Erkrankungen, die im Zusammenhang mit Störungen des Vitamin-B-Stoffwechsels stehen. Treatment of diseases related to disorders of the vitamin B-metabolism.

6. 6 Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Use of a compound according to any one of claims 1 to 8 for the preparation of a pharmaceutical composition for the

Behandlung von Erkrankungen, die im Zusammenhang mit Störungen des Immunsystems stehen . Treatment of diseases which are associated with an impaired immune system. - 22 - - 22 -

1 7. 1 7 Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Behandlung von Erkrankungen, die im Zusammenhang mit Störungen enzymatischer Reaktionen stehen. Use of a compound according to any one of claims 1 to 8 for the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment of diseases related to disorders of enzymatic reactions.

1 8. 1 8 Verwendung nach Anspruch 1 7 als Effektor der enzymatische Aktivität von Stickstoffmonoxid-Synthasen. Use according to claim 1 to 7 as an effector of the enzymatic activity of nitric oxide synthases.

1 9. 1 9 Verwendung von Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 8 als Nachweisreagenzien. Use of compounds according to any one of claims 1 to 8 as a detection reagent.

20. 20th Verwendung nach Anspruch 1 9 zum Nachweis von Biomolekülen. Use according to claim 1 9 for the detection of biomolecules.

21 . 21st Verwendung nach Anspruch 20 zum Nachweis einzelsträngiger Nucleinsäuren. Use according to claim 20 for the detection of single stranded nucleic acids.

22. 22, Verwendung von Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 8 für elektrochrome Anwendungen. Use of compounds according to any one of claims 1 to 8 for electrochromic applications.

23. 23, Konjugate von Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 8 mit Biomolekülen. Conjugates of compounds of any of claims 1 to 8 with biomolecules.

24. 24th Derivate von Verbindungen nach einem der vorhergehenden Ansprüche der allgemeinen Formeln ( 1 1 ), (1 2) oder ( 1 3) : Derivatives of compounds according to any one of the preceding claims of the general formula (1 1), (2: 1) or (1 3):

Figure imgf000025_0001
23 - 23 -

Figure imgf000026_0001

YH YH

Figure imgf000026_0002

R6 R6

worin X 1 , X 2 , X 3 , Y, Z, R 1 -R 4 , R 5 und R 6 wie in Anspruch 1 definiert sind. wherein X 1, X 2, X 3, Y, Z, R 1-R 4, R 5 and R 6 are as defined in claim 1.

ERSATZBUTT (REGEL 26) REPLACEMENT BUTT (RULE 26)

Description  translated from German  (OCR text may contain errors)

Neue Knoevenagel-Kondensationsprodukte, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung Knoevenagel condensation of new products, processes for their preparation and use

Beschreibung Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Knoevenagel-Kondensations- produkte, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung insbesondere für pharmazeutische und analytische Zwecke. The present invention relates to novel Knoevenagel condensation products, to processes for their preparation and their use, in particular for pharmaceutical and analytical purposes. Weiterhin werden Konjugate der Knoevenagel-Kondensate mit Biomolekülen offenbart. Furthermore, conjugates of Knoevenagel condensates are revealed with biomolecules.

In einer Publikation von Feigl (Z. Anal. Chem. 74 (1 928), 380-386) ist die Verwendung von p-Dimethylaminobenzylidenrhodanin zum Nachweis von Silber beschrieben. In a publication of Feigl (Z. Anal. Chem 74 (1928), 380-386), the use of p-Dimethylaminobenzylidenrhodanin for the detection of silver is described. Escobar Godoy und Guiraum Perez (Analyst 1 1 1 ( 1 986), 1 297-1 299) beschreiben die Verwendung des Pyridoxalanalogs (Z)- Pyridoxylidenrhodanin zur spektroskopischen Quantifizierung von Silber. Escobar Godoy Guiraum and Perez (Analyst 1 1 1 (1986), 1297-1299) describe the use of Pyridoxalanalogs (Z) - Pyridoxylidenrhodanin for spectroscopic quantification of silver.

Das der vorliegenden Erfindung zugrundliegende Problem bestand darin, neue Verbindungen bereitzustellen, die insbesondere für pharmazeutische und analytische Zwecke eingesetzt werden können. The problem of the present invention is based was to provide new compounds which can be used particularly for pharmaceutical and analytical purposes. Diese Aufgabe wird gelöst durch die Synthese der Verbindung (Z)-5'-O-Phosphono-pyridoxy- lidenrhodanin (3), bei der es sich um ein Derivat des Vitamin B6-Coenzyms Pyridoxal-5'-phosphat ( 1 ) handelt. This object is achieved by the synthesis of the compound (Z)-5'-O-phosphono-pyridoxy lidenrhodanin (3) in which is a derivative of Vitamin B6 coenzyme pyridoxal-5'-phosphate (1). Die Herstellung der Verbindung (3) erfolgt durch Umsetzung von ( 1 ) mit der synthetischen heterozyklischen Ver- bindung Rhodanin (2) in einer Knoevenagel-Kondensation (vgl. auch Kesel et al., Tetrahedron 52 ( 1 8.1 1 .1 996), 14787-14800) . The preparation of compound (3) is prepared by reacting (1) with the synthetic heterocyclic compound rhodanine (2) in a Knoevenagel condensation (see also Kesel et al., Tetrahedron 52 (1 8.1 1 .1 996) 14787-14800).

Die Verbindung 3 trägt den Namen (Z)-5-[[5-Hydroxy-6-methyl-3- [(phosphonooxy)methyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon. Compound 3 has the name (Z) -5 - [[5-Hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone. Der Rhodanin-Teil dieses Moleküls ist in der Lage, an Biomoleküle wie etwa einzelsträngige Nukleinsäuren zu binden. The rhodanine part of this molecule is to bind single stranded nucleic acids such as to be able to biomolecules. Die geladene Phosphat-Gruppe sorgt für eine gute Wasserlöslichkeit. The charged phosphate group ensures good water solubility. Die Verbindung 3 unterliegt einer (Z/E)-Stereoisomerie zum (E)-Isomeren 4. Compound 3 is subject to a (Z / E)-stereoisomers of (E)-isomers of 4 Diese Cis/Trans-Umlagerung wird zB durch UV-Bestrahlung mit den Wellenlängen 254 nm oder/und 366 nm ausgelöst. These cis / trans-migration, for example is triggered by UV radiation having wavelengths of 254 nm and / or 366 nm.

In dipolar-aprotischen Lösungsmitteln liegt die ursprünglich gelbe Verbindung 3 als rotes 3-Pyridinolat 5 in Form einer freien Säure vor, zB in Pyridin oder Dimethylsulfoxid (DMSO) . In dipolar aprotic solvents, the original yellow compound 3 is present as a red-3 Pyridinolat 5 in the form of a free acid, such as in pyridine or dimethyl sulfoxide (DMSO).

Figure imgf000004_0001

Pyridoxal-5'-Phosphat Rhodanin ( Z)-5'-0-Phosphorιo '-pyridoxylidei Pyridoxal-5'-phosphate rhodanine (Z)-5'-0-Phosphorιo '-pyridoxylidei

Die gelbe Verbindung 3 bildet ein tiefrotes Mononatriumsalz, dessen Struktur durch Röntgenstrukturanalyse aufgeklärt werden konnte. The yellow compound 3 is a deep red monosodium salt, the structure was elucidated by X-ray structural analysis. Es wurde als Hemiheptadecahydrat (8,5 Hydrat) kristallisiert und liegt als (Z)- Stereoisomer 6 vor. It was crystallized as Hemiheptadecahydrat (8.5 hydrate) and is present as a (Z) - stereoisomer from 6. Das Mononatriumsalz 6 unterliegt bei einer UV- Bestrahlung ebenfalls der Cis/Trans-Umlagerung zum roten (E)-Stereoisome- ren 7. The monosodium salt 6 is subject to UV irradiation also the cis / trans rearrangement to the red (E)-stereoisomers 7

Derivate der Verbindung 3 können durch Reaktion mit C 12 -C 18 -Fettsäure- chloriden an der OH-Gruppe erhalten werden. Derivatives of Compound 3 can be obtained by reaction with C 12-C 18 fatty acid chlorides of the OH group.

Weiterhin betrifft die vorliegende Erfindung Verbindungen der allgemeinen Formel (8) . Furthermore, the present invention relates to compounds of the general formula (8).

Figure imgf000005_0001

worin: X 1 , X 2 und X 3 jeweils unabhängig ausgewählt sind aus O, S und NR 5 ; wherein: X 1, X 2 and X 3 are each independently selected from O, S and NR 5;

YO oder S ist; Z CR 5 oder N ist; Y is O or S, Z is CR 5 or N;

R\ R 2 , R 3 , R 4 und R 5 jeweils unabhängig ausgewählt sind aus beliebigen Substituenten; R 6 ausgewählt ist aus gegebenenfalls substituierten Kohlenwasserstoffresten und O und n 0 oder 1 ist; sowie Salze, zB Salze mit Alkalimetall-, Erdalkalimetall- oder Ammoniumionen, Hydrate und Stereoisomere davon, mit der Maßgabe, daß die Verbindung nicht Pyridoxylidenrhodanin ist. R \ R 2, R 3, R 4 and R 5 are each independently selected from any substituent, R 6 is selected from optionally substituted hydrocarbon groups, and O, and n is 0 or 1, and salts, such as salts with alkali metal, alkaline earth metal or ammonium ions, hydrates, and stereoisomers thereof, with the proviso that the compound is not Pyridoxylidenrhodanin.

In den Verbindungen der allgemeinen Formel (8) ist X 1 vorzugweise O. In the compounds of general formula (8) X 1 is preferably O. X 2 ist vorzugsweise NR 5 , wobei R 5 Wasserstoff oder CC 4 -Alkyl und besonders bevorzugt Wasserstoff ist. X 2 is preferably NR 5, wherein R 5 is hydrogen or C 4-alkyl and most preferably hydrogen. X 3 ist vorzugsweise S. Y ist vorzugsweise S. Z ist vorzugsweise CR 5 , wobei R 5 Wasserstoff oder C r C 4 -Alkyl und besonders bevorzugt Wasserstoff ist. X 3 is preferably S. Preferably Y is S. Z is preferably CR 5, wherein R is C 4 alkyl and more preferably R 5 is hydrogen or C is hydrogen.

ERSATZBIAΓΓ (RΓ.GFL 26) Die Substituenten R 1 bis R 4 können an sich beliebige Substituenten sein, sofern sie mit der Gesamtstruktur kompatibel sind. ERSATZBIAΓΓ (RΓ.GFL 26) The substituents R 1 to R 4 may be any substituent on condition that they are compatible with the overall structure. Gegebenenfalls können R 1 und R 2 oder/und R 3 und R 4 miteinander verbrückt sein. Optionally, R 1 and R 2 or / and R 3 and R 4 may be bridged to each other. Beispiele für die Substituenten R 1 bis R 4 sind Wasserstoff, Halogen, Hydroxyl, Amin sowie gegebenenfalls substituierte Alkylreste, zB C bis C 6 -Alkyl, Aminoalkyl, Hydroxyalkyl, Alkoxy etc. Besonders bevorzugt enthält mindestens einer der Substituenten R bis R 4 eine unter physiologischen Bedingungen negativ geladene Gruppe, zB eine Säuregruppe wie etwa Phosphat, Carboxylat, Sulfonat etc. Examples of the substituents R 1 to R 4 are hydrogen, halogen, hydroxyl, amino and optionally substituted alkyl, for example C to C 6 alkyl, aminoalkyl, hydroxyalkyl, alkoxy, etc. Particularly preferably, at least one of the substituents R to R 4 are an under physiological conditions, negatively charged group, such as an acid group, such as phosphate, carboxylate, sulphonate etc.

Besonders bevorzugt handelt es sich bei den Verbindungen der allgemeinen Formel (8) um das (Z)-5-O-Phosphonopyridoxylidenrhodanin (3), sowie Salze, Hydrate und Stereoisomere davon. Particularly preferred are the compounds of the general formula (8) to which the (Z)-5-O-Phosphonopyridoxylidenrhodanin (3), as well as salts, hydrates and stereoisomers.

Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel (8), dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der Formel (9) A further object of the present invention is a process for preparing a compound of the general formula (8), characterized in that a compound of formula (9)

Figure imgf000006_0001

in einer Knoevenagel-Kondensation umsetztmit einer Verbindung der Formel (1 0) umsetztmit in a Knoevenagel condensation of a compound of formula (1 0)

Figure imgf000006_0002

ERSATZBUTT (REGEL 26) worin X 1 , X 2 , X 3 , Y, Z, R 1 -R 5 und R 6 wie für die Verbindungen 8 definiert sind. SUBSTITUTE BUTT (RULE 26) wherein X 1, X 2, X 3, Y, Z, R 1-R 5 and R 6 are as defined for the compounds eighth Die Reaktion erfolgt vorzugsweise in einem im wesentlichen äquimola- ren Verhältnis von 9 zu 1 0 in einem geeigneten Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch. The reaction is preferably carried out in a substantially equimolar ratio of 9 to 1 0 in a suitable solvent or solvent mixture. Die Temperatur ist vorzugsweise Raumtemperatur bis Rückflußtemperatur des Lösungsmittels. The temperature is preferably room temperature to reflux temperature of the solvent.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (8) besitzen überraschenderweise pharmazeutische Wirksamkeit. The compounds of general formula (8) surprisingly have pharmaceutical activity. Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist somit eine pharmazeutische Zusammensetzung, die als Wirkstoff eine Verbindung wie zuvor angegeben (vorzugsweise ohne Berücksichtigung des Disclaimers in Anspruch 1 ) sowie gegebenenfalls pharmazeutisch übliche Zusatz-, Hilfs-, Träger- und Verdünnungsstoffe enthält. Another object of the invention is thus a pharmaceutical composition as stated above which comprises (preferably, excluding the disclaimer in claim 1), and optionally pharmaceutically conventional additives, excipients, carriers and diluents, a compound as active ingredient.

Eine erste wichtige Anwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen ist die Behandlung von Infektionskrankheiten, beispielsweise von viralen Infektionen, parasitären Erkrankungen, Pilzerkrankungen oder bakteriellen Erkrankungen. A first important application of the inventive compounds is the treatment of infectious diseases such as viral infections, parasitic diseases, fungal diseases or bacterial diseases. Besonders bevorzugt ist die Verwendung zur Behandlung von viralen Infektionen, insbesondere von solchen viralen Infektionen, die durch behüllte Viren, wie etwa Hepadnaviren, Herpesviren oder Retroviren, zB HIV, verursacht werden. Particularly preferred is the use for the treatment of viral infections, particularly those viral infections caused by enveloped viruses, such as hepadnaviruses, herpes viruses or retroviruses such as HIV. Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben sich jedoch auch geeignet für die Behandlung von Krankheiten erwiesen, die durch andere Viren, wie etwa Influenza- oder Papillomaviren hervorgerufen werden. The compounds according to the invention, however, have also been found suitable for the treatment of diseases caused by other viruses, such as influenza or papillomaviruses. Weiterhin haben sich die erfindungsgemäßen Verbindungen als gut geeignet zur Bekämpfung von Parasiten wie etwa Leishmanien, Plasmodien oder Trypanosomen erwiesen. The compounds of the invention have been found to be well suited for the control of parasites such as Leishmania, Trypanosoma or Plasmodium. Am meisten bevorzugt werden die Verbindungen in der HIV-Therapie, beispielsweise in der Kombinationstherapie mit anderen Mitteln wie etwa AZT oder DDI eingesetzt. Most preferably, the compounds in the treatment of HIV, for example, be used in combination therapy with other agents such as AZT or DDI.

Darüber hinaus sind die erfindungsgemäßen Verbindungen auch zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen, bespielsweise von Leukämien, insbesondere von T-Zell-Leukämien, oder von Hauttumoren wie malignes In addition, compounds of the invention and to combat tumors, recordable example of leukemias, especially T-cell leukemias, or of skin tumors such as malignant

Melanom oder Kaposi-Sarkom, geeignet. Melanoma or Kaposi's sarcoma, are suitable. Überraschenderweise zeigen sie gegenüber malignen Zellen eine selektive zytotoxische Wirkung, die bei normalen Zellen nicht auftritt. Surprisingly, they exhibit malignant cells to a selective cytotoxic effect which does not occur in normal cells.

Die Verbindungen 8 weisen auch immunmodulatorische Wirkungen auf und sind daher beispielsweise zur Behandlung von Automimmunerkrankungen wie etwa Multiple Sklerose, Alzheimer'sche Krankheit, Lupus erythemato- sus, Myasthenia gravis, chronische Arthritis, Diabetes mellitus Typ I etc. und verschiedene neurodegenerative Erkrankungen geeignet. 8 The compounds also have immunomodulatory effects and are therefore, for example for the treatment of Automimmunerkrankungen such as multiple sclerosis, Alzheimer's disease, erythemato-sus lupus, myasthenia gravis, chronic arthritis, diabetes mellitus type I, neurodegenerative diseases, etc., and various suitable.

Weiterhin sind die Verbindungen 8 zur Behandlung von Erkrankungen geeignet, die im Zusammenhang mit Störungen des Vitamin B-Stoffwechsels bestehen, zB als Vitamin B6-Antagonisten. Furthermore, the compounds 8 are suitable for treating diseases that are associated with disorders of the metabolism of vitamin B such as vitamin B6 antagonists.

Noch eine weitere Anwendung sind Erkrankungen, die im Zusammenhang mit Störungen enzymatischer Reaktionen stehen. Yet another application are diseases that are associated with disorders of enzymatic reactions. Die erfindungsgemäßen Verbindungen wirken als Effektoren, zB Aktivatoren, Inhibitoren oder Modifikatoren, auf enzymatische Reaktionen des Caspasensystems, und insbesondere als Inhibitoren von Stickstoff monoxid-Synthasen. The compounds of the invention act as effectors, such as activators, inhibitors or modifiers of Caspasensystems on enzymatic reactions, and in particular as inhibitors of nitrogen monoxide synthase.

Darüber hinaus wurde gefunden, daß die Verbindungen 8 die Sekretion von TNFσ in T-Lymphozyten beeinflussen können. In addition, it has been found that the compounds 8 can affect the secretion of TNFσ in T-lymphocytes. Außerdem sind sie der Lage, an den zellulären CD38 Rezeptor zu binden, wobei eine Hemmung der Bindung des HIV gp41 erreicht wird. They are also able to bind to the cellular receptor CD38, wherein inhibition of the binding of HIV gp41 is achieved. Auf diese Weise wird der Signalübertragungsweg von CD38 entkoppelt, was zu einer Hemmung der Syn- cytienbildung, der NO-Freisetzung, dem T-Zelltod durch Apoptose, und der Einzelzellysis führt. Thus, the signal transduction pathway of CD38 is decoupled, resulting in an inhibition of the synthesis cytienbildung, of NO release, the T-cell death by apoptosis and the Einzelzellysis.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können als solche für therapeutische Zwecke eingesetzt werden. The compounds of the invention can be used as such for therapeutic purposes. Sie können jedoch ebenfalls als Chelate mit mehrwertigen Metallionen oder als nichtkovalente oder/und kovalente Konjugate mit Biomolekülen, zB Nukleinsäuren, Proteinen, Lipiden, Fettsäuren etc. eingesetzt werden. However, they can also be used as chelates with polyvalent metal ions or as a non-covalent and / or covalent conjugates with biomolecules such as nucleic acids, proteins, lipids, fatty acids, etc.. Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können in beliebiger Form vorliegen, zB als Cremes, Salben, injizierbare oder oral applizierbare Flüssigkeiten, liposomale Formulierungen, Tabletten, Dragees, Kapseln etc. Die Applikation kann zB lokal oder systemisch, topisch, oral oder per Injektion erfolgen. The pharmaceutical compositions of the invention may be in any form such as creams, ointments, injectable or orally administered liquids, liposomal formulations, tablets, capsules, etc. The application can for example be done locally or systemically, topically, orally or by injection. Die Dosierung kann in weiten Bereichen, zB 0,01 μg bis 1 mg pro kg Körpergewicht je nach Art der Erkrankung und Applikation variiert werden. The dosage can vary within wide ranges, eg 0.01 micrograms to 1 mg per kg of body weight varies depending on the type of disease and the application.

Darüber hinaus sind die erfindungsgemäßen Verbindungen auch als Nachweisreagenzien geeignet. In addition, compounds of the invention are also useful as detection reagents. Einerseits können sie in Form von radioaktiv, zB mit 3 H, 14 C, 32 P oder 35 S-markierten Derivaten eingesetzt werden. On one hand, they may, for example with 3 H, 14 C, 32 P or 35 S-labeled derivatives are used in the form of radioactively. Bevorzugt ist jedoch der Einsatz in unmarkierter Form, da aufgrund ihrer starken farbgebenden bzw. fluoreszenten Eigenschaften ein einfacher Nachweis in biologischen Systemen möglich ist. However, it is preferred to use in unlabeled form as a result of its strong coloring and fluorescent properties of a simple detection in biological systems is possible. Insbesondere sind die erfindungsgemäßen Verbindungen daher zum Nachweis von Biomolekülen, zB in diagnostischen Analyseverfahren, beispielsweise zum Nachweis einzelsträngiger Nukleinsäuren geeignet. In particular, the compounds of the invention are therefore for the detection of biomolecules, for example, suitable in diagnostic assay methods, for example for detecting single-stranded nucleic acids. Auch zur Strukturaufklärung, zB zur Sequenzierung von Proteinen oder Nukleinsäuren, sind die Verbindungen geeignet. Also for elucidating the structure, such as the sequencing of proteins or nucleic acids, the compounds are useful.

Darüber hinaus können die erfindungsgemäßen Verbindungen auch für elektrochrome Anwendungen, zB als molekulardigitale Schaltersubstanzen oder Indikatoren für pH-Wert, Temperatur und Lösungsmittel eingesetzt werden. In addition, the compounds of the invention for electrochromic applications, for example can be used as molecular substances digital switches or indicators for pH, temperature and solvent.

Weiterhin sind die erfindungsgemäßen Verbindungen bzw. Derivate davon als Absorber für Ionen, organische Substanzen etc. oder aufgrund ihrer intensiven Farben und reversiblen Farbänderungen für dekorative Anwendungen geeignet. The compounds of the invention or derivatives thereof as an absorber of ions, organic substances, etc., or because of their intense colors and reversible color changes are suitable for decorative applications. Insbesondere sind in diesem Zusammenhang die Erd- alkalimetallsalze, zB Mg- oder Ca-Salze der Verbindungen zu nennen, die in Form von Gelen vorliegen. Specifically, in this regard, the alkaline earth metal salts, for example, be mentioned Mg or Ca salts of the compounds which are present in the form of gels. Noch ein weiteres Anwendungsgebiet ist die Nanotechnologie, wobei beispielsweise mit Lasersysteme angegeregte einzelne fluoreszierende Farbstoffmoleküle und Biomolekülderivate durch empfindliche Detektions- systeme, zB CCD-Kameras oder Avalanche-Detektoren und optischen Techniken auf Dünnschichtplatten, in Membranen, Zellen, Tropfen, Kapillaren usw. detektiert und lokalisiert werden können. Still another area of ​​application is nanotechnology, where, for example with laser systems detected angegeregte single fluorescent dye molecules and Biomolekülderivate by sensitive detection systems such as CCD cameras or avalanche detectors and optical techniques on thin-layer plates, in membranes, cells, drops, capillaries, etc., and can be isolated. Weitere Möglichkeiten der Einzelmolekül-Lokalisierung sind die optische Raster-Nahfeld- Mikroskopie auf Minichips, die konfokale Mikroskopie in Polyacrylamidgelen, beispielsweise die 2- oder mehrdimensionale Gelelektophorese von Nukleinsäuren. Further possibilities for single-molecule localization are the optical scanning near-field microscopy on mini chip confocal microscopy in polyacrylamide gels, such as 2 - or multi-dimensional gel electrophoresis of nucleic acids.

Schließlich betrifft die vorliegende Erfindung auch Derivate der Verbindungen (8), die durch hydrolytischen Abbau entstehen und beispielsweise die allgemeinen Formeln 1 1 , 12 oder 13 aufweisen: Finally, the present invention also relates to derivatives of the compounds (8) caused by, for example hydrolytic degradation, and have the general formula 1 1, 12 or 13:

Figure imgf000010_0001

ERSA1ZBUTT (REGEL 26) ERSA1ZBUTT (RULE 26)

Figure imgf000011_0001

worin X 1 , X 2 , X 3 , Y, Z, R 1 -R 4 , R 5 und R 6 wie für die Verbindungen 8 definiert sind. wherein X 1, X 2, X 3, Y, Z, R 1-R 4, R 5 and R 6 are as defined for the compounds eighth

Weiterhin wird die Erfindung durch die nachfolgenden Beispiele und Abbildungen erläutert. The invention is further illustrated by the following examples and figures. Es zeigen: In the drawings:

Abb. 1 : die durch Verbindung (3) vermittelte Protektion von Zellen gegenüber einer HIV-Infektion. Figure 1 of the compound (3) of cell-mediated protection against HIV infection.

Abb.2: eine schematische Darstellung von Hydrolysenebenprodukten, die bei der Synthese der Verbindung (3) entstehen; Fig.2: a schematic representation of Hydrolysenebenprodukten, resulting from the synthesis of the compound (3);

Beispiele Examples

Herstellungsverfahren von 3 Preparation process 3

Herstellung des Rohproduktes: Preparation of the crude product:

Man löst 3,83 g 2-Thioxo-4-thiazolidinon (Rhodanin) (M = 133, 18 g/mol; n = 28,76 mmol) in 150 ml absolutem Ethanol in einem 50 ml Rundkolben mit Rückflußkühler und gibt 7,63 g Pyridoxal-5'-phosphat-monohydrat (M = 265,16 g/mol; n = 28,78 mmol) hinzu. Dissolve 3.83 g of 2-thioxo-4-thiazolidinone (rhodanine) (M = 133, 18 g / mol, n = 28.76 mmol) in 150 ml absolute ethanol in a 50 ml round bottom flask with reflux condenser and gives 7.63 g Pyridoxal-5'-phosphate monohydrate (M = 265.16 g / mol, n = 28.78 mmol). Das Pyridoxal-5'-phosphat- monohydrat löst sich in der Kälte fast nicht. The pyridoxal 5'-phosphate monohydrate dissolves almost not in the cold.

ERSATZBUTT (REGEL 26) Man kocht auf dem Wasserbad unter Rühren am Rückfluß. REPLACEMENT BUTT (RULE 26) is boiled on a water bath with stirring under reflux. Das Pyridoxal-5'- phosphat-monohydrat geht nun langsam in Lösung und eine zunächst gelbe, dann orange, dann rote Suspension entsteht. The pyridoxal 5'-phosphate monohydrate is now slowly in solution and a first yellow, then orange, then red suspension. Nach 20 min Sieden gibt man durch den Kühler 1 50 ml Wasser zu, weil die Suspension aufzustoßen beginnt. After 20 min of boiling it is through the radiator to 1 50 ml of water, because the suspension begins push on. Man erwärmt noch 10 min, wobei das rote Reaktionsprodukt ausfällt und zum Aufstoßen führt. It is heated for 10 min, the red reaction product precipitates and leads to regurgitation. Danach kühlt man nicht mehr als 2 Stunden im Gefrierfach bei einer Temperatur von - 18°C. Then cooled no more than 2 hours in the freezer at a temperature of - 18 ° C.

Aufarbeitung des Rohproduktes Workup of the crude product

Das orange Produkt wird abgesaugt, mit der Mutterlauge überführt und mit 1 00 ml eiskaltem abs. The orange product is filtered, transferred to the mother liquor and 00 with 1 ml ice-cold abs. Ethanol gewaschen. Ethanol. Vakuumtrocknung im Exsikkator über wasserfreiem Calciumchlorid; Ausbeute: 9,85 g orangegelbes Rohprodukt (Z)-5-[[5-Hydroxy-6-methyl-3-[phosphonooxy)methyl]-4-pyridinyl]- methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon. Vacuum drying in a desiccator over anhydrous calcium chloride, yield: 9,85 g orange-yellow crude product (Z) -5 - [[5-Hydroxy-6-methyl-3-[phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] - methylene]-2-thioxo -4-thiazolidinone. Das Produkt enthält Edukte, Nebenprodukte und trotz Vakuumtrocknung Ethanol und Wasser. The product containing starting materials, by-products and vacuum drying despite ethanol and water.

Reinigung des Rohprodukts durch lonentausch-Umfällung: Purification of the crude product by ion exchange-reprecipitation:

9,85 g Rohprodukt werden in 610 ml Wasser in einem 2000 ml Rundkolben suspendiert. 9.85 g of crude product is suspended in 610 ml of water in a 2000 ml round bottom flask. Unter Rühren werden 200 ml einer bei Raumtemperatur (22°C) gesättigten Lösung [ß(NaHCO 3 ) = 100 mg/ml] von wasserfreiem Natrium- hydrogencarbonat [n(NaHCO 3 ) = 238, 10 mmol] in mehreren Portionen hinzugefügt. While stirring, 200 ml of a at room temperature (22 ° C) saturated solution [ß (NaHCO 3) = 100 mg / ml] of anhydrous sodium bicarbonate [n (NaHCO 3) = 238, 10 mmol] are added in several portions. Diese nunmehr rote Lösung wird mit 238, 10 ml (238, 1 0 mmol HCI) einer 1 ,0 M Salzsäure titriert. This solution is now red with 238, 10 ml (238, 0 1 mmol HCl) titrated to a 1 0 M hydrochloric acid. Die resultierende Mischung wird weitere 1 5 min gerührt. The resulting mixture is stirred for a further 1 5 min. Am Ende der Titration (pH 2) schlägt die Farbe von rot nach gelb um und die Säure 3 fällt aus. At the end of the titration (pH 2) the color changes from red to yellow and 3 drops of the acid. Sie wird abgesaugt und 24 h bei einem Druck von 4 mbar und einer Temperatur von 70°C getrocknet. It is filtered off with suction and a pressure of 4 mbar and dried at a temperature of 70 ° C for 24 h. Dann wird sie noch 24 h bei einem Druck von 0,001 mbar im Ölpumpenvakuum bei Raumtemperatur getrocknet. Then it is dried at a pressure of 0.001 mbar in an oil pump vacuum at room temperature for 24 h. Ausbeute: 8,70 g (83%, bezogen auf die Gesamtsynthese) gelbes, amorphes Pulver (Z)-5-[[5-Hydroxy-6-methyl-3- [(phosphonooxy)methyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon, Gehalt w > 96% (1H-NMR). Yield: 8.70 g (83% based on the total synthesis) of a yellow, amorphous powder (Z) -5 - [[5-Hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene] -2-thioxo-4-thiazolidinone, W content> 96% (1H-NMR).

Die Analytik der Verbindung 3 umfaßt 1 H-NMR-Spektroskopie, 13 C-NMR- Spektroskopie, 31 P-NMR-Spektroskopie, RP-18 HPLC, Fast Atom Bombardement Massenspektrometrie (FAB MS), IR-Spektroskopie, UV-Spek- trophotometrie und Fluoreszenzspektrophotometrie. The analysis of compound 3 including 1 H NMR, 13 C NMR, 31 P NMR spectroscopy, RP-18 HPLC, fast atom bombardment mass spectrometry (FAB MS), IR spectroscopy, UV spectroscopy trophotometrie and fluorescence spectrophotometry. Es folgen typische analytische Daten der Verbindung 3. The following are typical analytical data of the compound 3

C 1l H 11 N 2 O 6 PS 2 , M = 362.31 g/mol. C 1l H 11 N 2 O 6 PS 2, M = 362.31 g / mol. F.198°C - 201 °C (unter Zersetzung, unkorrigiert). F.198 ° C - 201 ° C (with decomposition, uncorrected).

FABMS(MH + berechnet für m/z 362.99): m/z (τe\. Int.) 363.0(12.0%, MH + ), 227.4 (18.1%), 270.4(8.7%), 171.2 (8.3%), 282.4(7.1%), 267.1 (2.8%), 283.4 (2.1%), 265.1 (1.5%). FABMS (MH + calculated for m / z 362.99): m / z (tau.e \ Int..) 363.0 (12.0%, MH +), 227.4 (18.1%), 270.4 (8.7%), 171.2 (8.3%), 282.4 (7.1%), 267.1 (2.8%), 283.4 (2.1%), 265.1 (1.5%).

1 H NMR(TFA-cZ): «52.91 (s, 3 H, 2'-CH 3 ), 5.42 (d, | 3 ( 31 P, 1 H) | =8.0 Hz, 2 H, 5'-CH 2 -OPO 3 H 2 ), 7.76 (s, 1 H, 4'-CH), 8.47 (s, 1 H, 6-CH). 1 H NMR (DMSO-tf6): δ 2.42 (s, 3 H, 2'-CH 3 ), 4.89 (d, | 3 ( 31 P, 1 H) | = 8.0 Hz, 2 H, 5'-CH 2 -OPO 3 H 2 ), 7.55 (s, 1 H, 4'-CH), 7.84 (s, 1 H, 6-CH). 1 H NMR (TFA-cZ): "52.91 (s, 3 H, 2'-CH 3), 5:42 (d, | 3 (31 P, 1 H) | = 8.0 Hz, 2H, 5'-CH 2 -OPO 3 H 2), 7.76 (s, 1 H, 4'-CH), 8:47 (s, 1 H, 6-CH) 1 H NMR (DMSO-TF6). δ 2.42 (s, 3 H, 2 '-CH 3), 4.89 (d, | 3 (31 P, 1 H) | = 8.0 Hz, 2 H, 5'-CH 2-OPO 3 H 2), 7.55 (s, 1 H, 4'-CH ), 7.84 (s, 1 H, 6-CH). 1HNMR(Pyridin-c/ 5 ): δ 2.72 (s, 3 H, 2'-CH 3 ), 5.62 (d, | 3 J( 31 P, 1 H) | = 7.5 Hz, 2 H, 5'CH 2 -OPO 3 H 2 ), 8,36 (s, 1 H, 4'CH), 8,53 (s, 1 H, 6-CH). 13 C NMR, BB-entkoppelt (TFA-c/): δ 16.83 (s, 2'-CH 3 ), 65.75 (s, 5'-CH 2 - OPO 3 H 2 ), 121.04, 122.13 (2 s, C-4'), 133.34 (s, C-6), 136.85, 136.91 (2 s, RR'C-SR"), 138,54 (s, C-5), 142.05 (s, C-4), 147.64 (s, C-2), 153.03 (s, C-3), 171.93 (s, C = O), 193.39 (s, C = S). 31 P NMR (TFA-tY): rf-4.24 (s, R-OPO 3 H 2 ). 1HNMR (pyridine-c / 5): δ 2.72 (s, 3 H, 2'-CH 3), 5.62 (d, | 3 J (31 P, 1 H) | = 7.5 Hz, 2 H, 2 5'CH -OPO 3 H 2), 8.36 (s, 1 H, 4'CH), 8.53 (s, 1 H, 6-CH) 13 C NMR, BB-decoupled (TFA-c /). δ 16.83 (s, 2'-CH 3), 65.75 (s, 5'-CH 2 - OPO 3 H 2), 121.04, 122.13 (2 s, C-4 '), 133.34 (s, C-6), 136.85 , 136.91 (2 s, RRC-SR "), 138.54 (s, C-5), 142.05 (s, C-4), 147.64 (s, C-2), 153.03 (s, C-3 ), 171.93 (s, C = O), 193.39 (s, C = S) 31 P NMR (TFA-tY). rf 4.24 (s, R-OPO 3 H 2).

FT IR (KBr): 3430 (v NH, m), 1713 (v HN-C = O, s), 1213 (v P = O in /?O(HO)PO 2 -, s), 1046(vC = SinS-CS-N, s), 1024 (v P = O in /?O(HO)PO 2 " , s). UV/VIS (H 2 O): Λ maXιl = 232 nm W(1%/1 cm) = 373], Λ max,2 = 308 nm [A (1%/1 cm) = 271], Λ max,3 = 353 nm [A (1%/1 cm) = 413], λ maxA = 454 nm [A (1%/1 cm) = 227]. US/VIS (MeOH): λ maXι1 =291 nm [A (1%/1 cm) = 245], λ maXι2 = 347 nm FT IR (KBr): 3430 (NH v, m), 1713 (v HN-C = O, s), 1213 (v P = O in / O (HO) PO 2 -, s?), 1046 (vC = SinS-CS-N, s), 1024 (? v P = O in / O (HO) 2 PO ", s) UV / VIS (H 2 O). maXιl Λ = 232 nm W (1% / 1 cm ) = 373], Λ max, 2 = 308 nm [A (1% / 1 cm) = 271], Λ max, 3 = 353 nm [A (1% / 1 cm) = 413], λ = 454 nm maxA [A (1% / 1 cm) = 227] U.S. / VIS (MeOH). maXι1 λ = 291 nm [A (1% / 1 cm) = 245], λ = 347 nm maXι2

ERSATZBUTT (REGEL 26) 11a REPLACEMENT BUTT (RULE 26) 11a

[A (1%/1 cm) =489]. [A (1% / 1 cm) = 489].

UV/VIS (DMSO):Λ max = 518 nm [A (1%/1 cm) = 98]. UV / VIS (DMSO): Λ max = 518 nm [A (1% / 1 cm) = 98].

Fluoreszenz Exzitationsspektrum (ex) und Emissionsspektrum (em) (DMSO): Fluorescence excitation spectrum (ex) and emission (em) (DMSO):

Λ em = 575 nm:Λ ex max, , = 355 m, Λ ex, max, 2 = 397 nm, λ e ma 3 = 451 nm, λ eXι max 4 = 467 nm, Λ ex, maX 5 = 483 nm, λ eXι max, 6 = 493 nm, Λ ex, max, 7 = 518 nm; Λ ex - 490nm:Λ em,max = 575 nm. Em = 575 nm, Λ: Λ ex max,, = 355 m, Λ ex, max, 2 = 397 nm, λ e ma 3 = 451 nm, λ max eXι 4 = 467 nm, Λ ex, 5 maX = 483 nm, eXι λ max, 6 = 493 nm, Λ ex, Max, 7 = 518 nm, Λ ex - 490nm: Λ em, max = 575 nm

Fluoreszenz Exzitationsspektrum (ex) und Emissionsspektrum (em) (Pyridin): Fluorescence excitation spectrum (ex) and emission (em) (pyridine):

Λ em = 575 nm:Λ ex,max, , = 451 nm,Λ ex,max,2 = 467 nm, λ e max, 3 = 471 nm, Λ βχ , max, 4 = 483 nm, λ eXι max , 5 = 493 nm, Λ ex , max , 6 = 518 nm; λ ex = 490nm:Λ em,max - 575 nm. Em = 575 nm, Λ: Λ ex, max,, = 451 nm, Λ ex, max, 2 = 467 nm, λ max s, 3 = 471 nm, Λ βχ, max, 4 = 483 nm, λ max eXι, 5 = 493 nm, Λ ex, max, 6 = 518 nm, λ ex = 490 nm: Λ em, max - 575 nm

ERSATZBUTT (REGEL 26) - 1 2 - 2. REPLACEMENT BUTT (RULE 26) - 1 2 - 2 Herstellungsverfahren von 6 Manufacturing process of 6

2.1 2.1

Eine Masse von 363 mg (Z)-5-[[5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)me- thyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon (3) (1 ,0 mmol) wird mit 20,0 ml 0, 10 M Natronlauge gemischt (2,00 mmol NaOH) . A mass of 363 mg of (Z) -5 - [[5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone (3) ( 1 0 mmol) of sodium hydroxide is mixed with 20.0 ml of 0 10 M (2.00 mmol NaOH). Nach der Vermischung mit 10,0 ml abs. After mixing with 10.0 ml of abs. Ethanol wird die Lösung 24 h bei einer Temperatur von -1 8°C gekühlt. Ethanol, the solution is cooled at a temperature of 8 ° C for 24 h -1. Die feinkristallinen Nadeln werden abgesaugt. The fine crystalline needles are extracted. Ausbeute: 340 mg (63%) rotes (Z)-5-[[3-Hydroxy-2-methyl-5- [(phosphonooxy)methyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazolidinon- mononatriumsalz-hemiheptadeca (8 1 /2) hydrat (6). Yield: 340 mg (63%) of a red (Z) -5 - [[3-hydroxy-2-methyl-5-[(phosphonooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone monosodium salt hemiheptadeca-(8 1/2) hydrate (6). Vor einer Elementaranalyse wurde dieses Produkt bei einem Druck von 0, 1 mbar im Wasserstrahlpumpenvakuum bei einer Temperatur von 70°C zwei Tage in einer Trockenpistole getrocknet: tiefrotes (Z)-5-[[5-Hydroxy-6-methyl-3-[(phospho- nooxy)methyl]-4-pyridinyl]methylen]-2-thioxo-4-thiazoIidinon-mononatrium- salz-hemipenta (2 1 /2) hydrat (6) . Prior to elemental analysis of this product was at a pressure of 0, dried 1 mbar in a water jet pump vacuum at a temperature of 70 ° C for two days in a drying pistol: deep red (Z) -5 - [[5-hydroxy-6-methyl-3-[ (phospho-nooxy) methyl]-4-pyridinyl] methylene]-2-thioxo-4-thiazoIidinon monosodium salt-hemipenta (2 1/2) hydrate (6).

2.2 2.2

8,70 g trockene Verbindung 3 (24,00 mmol) werden mit 240,00 ml einer 0, 1 0 M Natriumhydroxidlösung (24,00 mmol NAOH) vermischt und anschließend mit 1 24,00 ml Ethanol versetzt. 8.70 g dry compound 3 (24.00 mmol) with 240.00 ml of a 0, 1 0 M sodium hydroxide (NaOH 24.00 mmol) were mixed and then mixed with 1 ml of ethanol, 24.00. Die Mischung wird für 24 h bei einer Temperatur von -1 8°C aufbewahrt. The mixture is kept for 24 hours at a temperature of 8 ° C -1. Die präzipitierten roten Kristalle werden filtiert. The precipitated red crystals were filtered. Es werden 7,55 g (73%) der Verbindung 6 erhalten. There are obtained 7.55 g (73%) of compound 6th

F.205 °C-208 °C (unter Zersetzung, unkorrigiert) . F.205 ° C-208 ° C (with decomposition, uncorrected).

Berechnet für CH 10 N 2 Na O 6 PS 2 o 2 1 /2 H 2 O, M = 429,33 g/mol; C 30,77% H 3,52% N 6,52 %, gefunden C 30,97% H 3,43% N 6,35%. Calculated for CH 10 N 2 Na 2 O 6 PS 2 o 1/2 H 2 O, M = 429.33 g / mol, C 30.77%, H 3.52%, N 6.52%, found C 30.97 % H 3.43% N 6.35%. FT IF (KBr) : 3277 (v OH Wasser, m, breit), 1 700 (v HN-C = O, w), 1 229 (v P = O in RP(HO)PO 2 \ s), 1 1 98 (v HN-C = S, s), 1 090 (v C = S in S-CS-N, s), 973 (v POC in PO-CH2-aryl,2) . FT IF (KBr): 3277 (OH v water, m, broad), 1700 (v HN-C = O, w), 1229 (v P = O in RP (HO) 2 PO \ s), 1 1 98 (v HN-C = S, s), 1090 (v C = S in S-CS-N, s), 973 (v POC PO-CH 2-aryl, 2). - 1 3 - 3. - 1 3 - 3 Nachweisverfahren für einzelsträngige Nukleinsäuren Detection methods for single-stranded nucleic acids

Die Verbindungen 3 und 6 können in radioaktiv markierter Form, zB markiert mit 3 H, 14 C, 32 P oder 35 S als Sonden zum Nachweis einzelsträngiger Nukleinsäuren eingesetzt werden. Compounds 3 and 6 may in radiolabeled form, eg marks are used as probes to detect single-stranded nucleic acids with 3 H, 14 C, 32 P or 35 S.

Die Substanzen 3/6 können außerdem für die Fluoreszenzdetektion einzelsträngiger DNA eingesetzt werden. The substances 3/6 can also be used for the fluorescent detection of single stranded DNA. Das (E)-Stereoisomere 4 fluoresziert in DSMO, das (Z)-Stereosisomere in Wasser erheblich weniger. The (E)-4 fluoresces in DSMO stereoisomers, the (Z)-stereoisomers in significantly less water. Bei Bindung des (E)-Stereoisomeren 4 an einzelsträngige DNA kann bei Auftreten der Fluoreszenz nach Extraktion mit DMSO einzelsträngige DNA nachgewiesen werden. Upon binding of the (E)-stereoisomers 4 to single stranded DNA single stranded DNA can be detected in fluorescence occurs after extraction with DMSO. Die zur Anregung verwendete Wellenlänge liegt im Bereich von 420 bis 500 nm, die Emission im DMSO oder Pyridin liegt bei 575 nm. The wavelength used for excitation in the range 420-500 nm, DMSO or pyridine in the emission is at 575 nm

Die Verbindungen 3, 4 und 6 zeigen eine nichtkovalente Assoziation an einzelsträngige DNA. The compounds 3, 4 and 6 show a non-covalent association of single-stranded DNA. Diese nichtkovalente Bindung kann durch Bestrahlung der UV-Licht der Wellenlängen 254 oder/und 366 nm photochemisch fixiert werden. This non-covalent binding can be fixed photochemically by irradiation of ultraviolet light of wavelength 254 and / or 366 nm. Dabei reagieren 3 und 4 mit einer Thymin-Nukleobasen-Methyl- gruppe photochemisch unter Abspaltung von H 2 S. In this case 3 and 4 react with nucleobases thymine methyl group photochemically with elimination of H 2 S.

14 14

4. 4 Hemmung von Isoformen des Enzyms Stickstoffmonoxydsynthase Isoforms of the enzyme inhibiting Stickstoffmonoxydsynthase

Die Substanz 6 hemmt die neuronalen, endothelialen und immunologisch/- induzierbaren Isoformen der Stickstoffmonoxydsynthase (NOS). 6 The substance inhibits the neuronal, endothelial and immunological / - inducible isoforms of Stickstoffmonoxydsynthase (NOS). Die Hemmkonstante (IC 50 ) für nNOS ist 61 ,25 μM. The inhibition constant (IC 50) for nNOS 61, 25 uM. Für eNOS und iNOS ist die Hemmkonstante (IC 50 ) 50μM. For eNOS and iNOS is the inhibition constant (IC 50) was 50 microns. Diese Werte werden durch Messung der Umwandlung von ( 3 H) Arginin zu ( 3 H) Citrullin unter Verwendung von rekombinanten humanen NOS Isoformen isoliert aus CHO Zellen bestimmt. These values ​​are determined by measuring the isolated conversion of (3 H), arginine (3 H) citrulline using recombinant human NOS isoforms in CHO cells.

ERSATZBUTr (REGEL 26) - 1 5 - 5. ERSATZBUTr (RULE 26) - 1 5 - 5 Zweidimensionale Nukleinsäureelektrophorese Two-dimensional Nukleinsäureelektrophorese

Die Substanz 3 kann in radioaktiv markierter oder unmarkierter Form für die zweidimensionale elektrophoretische Auftrennung einzelsträngiger Nukleinsäuren eingesetzt werden. The compound 3 can be used in radiolabeled or unlabeled form to the two-dimensional electrophoretic separation of single-stranded nucleic acids. In der ersten Dimension kann eine Trennung nach der Ladung und in der zweiten Dimension eine Trennung nach der Molekülgröße erfolgen. In the first dimension can be a separation according to the charge in the second dimension and separation by molecular size made. Die Verbindung 3 kann assoziativ oder kovalent an die Nukleinsäure gekoppelt werden. The compound 3 can be covalently or associatively coupled to the nucleic acid.

6. 6 Therapeutische Anwendung Therapeutic use

Die Substanz 3 und Derivate davon sind als therapeutische Mittel insbesondere für die Beeinflussung von Vermehrungsvorgängen von infektiösen Erregern wirksam, zB von solchen, die im Wirt mit Zwischenstufen als einzelsträngige DNA vorkommen wie etwa Retroviren, Herpesviren oder Hepatoviren. The substance 3, and derivatives thereof are effective as therapeutic agents in particular for the influencing of propagating operations of infectious agents, eg those with a single-stranded DNA intermediates occurring in the host, such as retroviruses, herpes viruses or Hepatoviren.

6.1 HIV-Inhibition 6.1 HIV Inhibition

Myeloische HUT78-Zellen werden einer Infektion mit HIV ausgesetzt in Abwesenheit bzw. in Gegenwart von 1 ,87 mM oder 0, 1 87 mM Verbindung 3. Myeloid HUT78 cells are exposed to infection with HIV in the absence and in the presence of 1, 87 or 0 mM, 1 mM compound 3 87 Der HIV-Nachweis erfolgt durch photometrische Bestimmung des p24-Antigens. The HIV detection is carried out by photometric determination of p24 antigen. Aus Abbildung 1 ist ersichtlich, daß in den erfindungsgemäß behandelten Zellen kein p24 nachweisbar war, während in der Kontrolle ab dem siebten Tag der p24 Test positiv war. From Figure 1 it can be seen that no p24 was detected in the treated cells according to the invention, while the control was positive on the seventh day of the p24 assay.

6.2 Behandlung von Herpes 6.2 Treatment of herpes

Ein Patient ( 1 7 Jahre, männlich) mit Herpes labialis wird mit einer One patient (1 7 years, male) with herpes labialis is a

Olivenöl-Wasser-Emulsion der Verbindung 3 (ca. 1 mg/ml) behandelt. Oil-water emulsion of the compound 3 (about 1 mg / ml). - 1 6 - - 1 6 -

Wenige Stunden nach lokaler Applikation auf die befallenen Hautpartien wird eine totale Remission gefunden. A few hours after local application to the affected skin areas a total remission is found.

6.3 Behandlung von Influenza 6.3 Treatment of Influenza

Ein Patient (51 Jahre, männlich) mit Virusgrippe wird mit einigen Tropfen einer H 2 O/DMSO Lösung der Verbindung 3 (ca. 1 μg/ml) oral behandelt. One patient (51 years, male) with influenza is treated with a few drops of H 2 O / DMSO solution of compound 3 (approximately 1 g / ml) orally. Über Nacht sind die Krankheitssympthome verschwunden. Overnight, the Krankheitssympthome are gone.

7. 7 Temperatur/Lösungsmittelindikator Temperature / solvent indicator

Die (Z/E)-Stereosisomerie der Verbindung 3 tritt abhängig von der Temperatur (Thermochromie) und abhängig vom Lösungsmittel (Solvatochromie) auf. The (Z / E)-Stereosisomerie of compound 3 occurs depends on the temperature (thermochromism) and depending on the solvent (solvatochromism) on. Daher kann 3 als Temperaturindikator oder/und Lösungsmittelindikator eingesetzt werden. Therefore, 3 can be used as a temperature indicator and / or solvent indicator.

8. 8 Digitale Schaltfunktion Digital switching function

Die (Z/E)-Stereoisomerie der Verbindungen 3 und 4 tritt abhängig vom Anlegen eines elektrischen Felds auf (Elektrochromie) . The (Z / E)-stereoisomers of compounds 3 and 4 occurs depends on the application of an electric field on (electrochromism). Daher kann 3 als digitales Schaltelement aufgrund der unterschiedlichen fluoreszenzspek- troskopischen Eigenschaften gegenüber 4 zB bei Anregung durch Laserlicht mit der Wellenlängen von 480 nm eingesetzt werden. 3 can therefore be used as a digital circuit element due to the different fluorescence spectroscopic properties to 4, for example, when excited by laser light having the wavelength of 480 nm. Dabei tritt nach Anlegen eines elektrischen Felds an 3 Umlagerung in 4 und damit Fluoreszenzemission bis 575 nm nach Anregung bei 480 nm auf. In this case, by applying an electric field to occur in three rearrangement 4 and thus fluorescence emission to 575 nm after excitation at 480 nm.

9. 9 Vitamin B6 Antagonismus Vitamin B6 antagonism

Die Verbindung 3 kann im Stoffwechsel als Antagonist des Coenzyms Pyridoxal-5'-Phosphat durch Bindung an die dieses Coenzym benötigende Enzyme wirken und deshalb tumorhemmende Eigenschaften aufweisen. The compound 3 can act as an antagonist in the metabolism of the coenzyme pyridoxal-5'-phosphate by this binding to the coenzyme-requiring enzymes and therefore have anti-tumor properties. - 1 7 - - 1 7 -

10. 10th Proliferationskontrolle Proliferation control

Die Verbindung 3 kann zur Proliferationskontrolle/Chemotherapie/Cytosta- setherapie von malignen Tumoren in lokaler Applikation auf Hauttumore (malignes Melanom, Karposi-Sarkom) gegebenenfalls in Verbindung mit UV- Bestrahlung eingesetzt werden oder/und zur Proliferationskontrolle von anderen Hautkrankheiten mit erhöhter Zellteilungsrate (zB Psoriaris) eingesetzt werden. The compound 3 can be used to Proliferationskontrolle/Chemotherapie/Cytosta- setherapie of malignant tumors in local application on skin tumors (malignant melanoma, Kaposi's sarcoma) are optionally used in combination with UV irradiation and / or for control of other proliferative skin diseases with increased rate of cell division (eg psoriasis) are used. Die Bindung der Verbindung 3 an replikationsaktive einzelstängige DNA-Bereiche kann durch UV-Bestrahlung photochemisch fixiert werden und führt zur lokal begrenzter Cytotoxizität. The binding of the compound 3 to single-stranded DNA replication active areas can be fixed by UV irradiation photochemically and leads to localized cytotoxicity.

1 1 . 1 1st Strukturaufklärung Structure elucidation

Die Verbindung 3 kann aufgrund ihrer Färb- und Fluoreszenzeigenschaften sowie ihrer Fähigkeit zur Kopplung an Biomoleküle, zB Proteine zur Strukturaufklärung eingesetzt werden, zB zur Aminosäuresequenzbestimmung von Proteinen oder zur DNA-Sequenzierung. The compound 3 can be used for elucidating the structure due to their color and fluorescent properties and their ability to be coupled to biomolecules, such as proteins, for example the amino acid sequence determination of proteins or for DNA sequencing.

12. 12th Nachweis von Hydrolysenebenprodukten Proof of Hydrolysenebenprodukten

Die Hydrolysenebenprodukte, die bei der Synthese der Verbindung 3 entstehen, werden massenspektroskopisch untersucht. The Hydrolysenebenprodukte, resulting in the synthesis of compound 3 are investigated by mass spectrometry.

Die entsprechenden Verbindungen sind in Abb. 2 aufgelistet. The corresponding compounds are listed in Figure 2.

Patent Citations
Cited PatentFiling datePublication dateApplicantTitle
WO1993012124A1 *8 Dec 199224 Jun 1993Astra AbSubstituted benzimidazoles, process for their preparation as well as their use
EP0636630A1 *25 Jul 19941 Feb 1995ZAMBON GROUP S.p.A.N-heteroaryl substituted derivatives of propanamide useful in the treatment of cardiovascular diseases
EP0693496A1 *18 Jul 199524 Jan 1996Roussel UclafNovel cephalosporins having a substituted benzyloxyimino radical in position 7, process for their preparation and their use as medicaments
Referenced by
Citing PatentFiling datePublication dateApplicantTitle
WO1999057124A1 *30 Apr 199911 Nov 1999Kesel Andreas JohannesMonomeric, oligomeric and polymeric knoevenagel condensation products
WO2000066599A1 *28 Apr 20009 Nov 2000Andreas Johannes KeselAntioxidative vitamin b6 analogs
WO2003034136A2 *16 Oct 200224 Apr 2003Hewlett Packard CoHigh resolution display
WO2003034137A2 *16 Oct 200224 Apr 2003Hewlett Packard CoPortable electronic reading apparatus
EP1128832A1 *19 Aug 19995 Sep 2001Viropharma IncorporatedCompounds, compositions and methods for treating or preventing viral infections and associated diseases
US636904210 Nov 19999 Apr 2002Oberthuer WalterAntioxidative vitamin B6 analogs
US694049716 Oct 20016 Sep 2005Hewlett-Packard Development Company, L.P.Portable electronic reading apparatus
Classifications
International ClassificationC07F9/58, A61P31/00, G01N33/52, A61K31/675, A61P43/00, C07F9/00, A61P37/00, C07F9/6558, C07F9/6561, A61P35/00, A61P37/02, A61P31/12
Cooperative ClassificationC07F9/6561, C07F9/582, C07F9/65583
European ClassificationC07F9/6561, C07F9/58G, C07F9/6558B
Legal Events
DateCodeEventDescription
18 Apr 2006ENP
Ref document number: PI9712930
Country of ref document: BR
27 May 2003WWR
Ref document number: PV1999-1609
Country of ref document: CZ
22 Jan 2003WWW
Ref document number: 1997951145
Country of ref document: EP
8 Nov 2002WWW
Ref document number: 1019997004073
Country of ref document: KR
19 Apr 2001WWG
Ref document number: 54798/98
Country of ref document: AU
25 Aug 2000WWP
Ref document number: 1019997004073
Country of ref document: KR
9 Mar 2000REGReference to a national code
Ref country code: DE
Ref legal event code: 8642
15 Sep 1999WWP
Ref document number: PV1999-1609
Country of ref document: CZ
25 Aug 1999WWP
Ref document number: 1997951145
Country of ref document: EP
31 May 1999WWE
Ref document number: 1997951145
Country of ref document: EP
26 May 1999WWE
Ref document number: 54798/98
Country of ref document: AU
Ref document number: 335977
Country of ref document: NZ
7 May 1999WWE
Ref document number: 1019997004073
Country of ref document: KR
Country of ref document: SK
Ref document number: 61799
7 May 1999ENP
Ref country code: JP
Ref document number: 1998 521071
Kind code of ref document: A
Format of ref document f/p: F
Ref document number: 61799
Country of ref document: SK
6 May 1999ENP
Ref document number: 2270973
Country of ref document: CA
5 May 1999WWE
Ref document number: PV1999-1609
Country of ref document: CZ
3 May 1999WWE
Ref document number: 09297078
Country of ref document: US
30 Sep 1998121
16 Jul 1998DFPE
2 Jul 1998COP
Free format text: PAGES 1/3-3/3, DRAWINGS, REPLACED BY NEW PAGES 1/3-3/3; DUE TO LATE TRANSMITTAL BY THE RECEIVING OFFICE
14 May 1998AL
Kind code of ref document: A1
Designated state(s): GH KE LS MW SD SZ UG ZW AT BE CH DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC
14 May 1998AKDesignated contracting states:
Kind code of ref document: A1
Designated state(s): AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY CA CH CN CU CZ DE DK EE ES FI GB GE GH HU ID IL IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MD MG MK MN MW MX NO NZ PL PT RO RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TR TT UA UG US UZ VN YU ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM